Importância dos solventes na extracção de moléculas para a obtenção de extractos

Os solventes têm o poder de extrair as moléculas, que têm o mesmo tipo de polaridade que os solventes.

Quando uma substância possui os dois tipos de polaridade de moléculas (polar e apolar), verifica-se que a diferença entre elas, origina uma polaridade predominante. Essa, interage com um solvente com as mesmas características da substância, respeitando assim, a regra da polaridade das moléculas que diz: solvente polar dissolve molécula polar, e solvente apolar dissolve molécula apolar.

Uma das características dos solventes é serem altamente voláteis, isto é, a capacidade que uma substância tem de passar do estado líquido, para o estado gasoso. Em resultado disto, a facilidade de inalação destas substâncias por via oral, torna-se um perigo para os seres vivos.

Outra característica é serem inflamáveis.

http://pt.wikipedia.org/wiki/Solvente

http://pt.wikipedia.org/wiki/Bromof%C3%B3rmio

Trabalho realizado por: Sérgio Santos Nº15

Escherichia coli

      Escherichia coli é uma bactéria bacilar Gram-negativa, é a mais comum e uma das mais antigas bactérias conhecidas pelo homem.

      A maior parte das estirpes de Escherichia coli é inofensiva.A utilizada nas experiencias levadas a cabo foi uma E.coli (também inofensiva) própria para uso laboratorial  

     O seu habitat natural é o lúmen intestinal dos seres humanos e de outros animais de sangue quente. É capaz de produzir fontes de energia suficientes para a sua sobrevivência, sendo um dos poucos seres vivos que o conseguem. 

     São susceptíveis aos ambientes secos, aos quais não resistem.

http://pt.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli

http://coisoblog.blogspot.com/2009/02/7-microbios-que-matam.html

Realizado por : André Piques

Agar nutritivo

O agar nutritivo é um hidrocolóide extraído de diversos géneros e espécies de algas marinhas vermelhas que consiste em uma mistura heterogénea de dois polissacarídeos, agarose e agaropectina. Essas substâncias aparecem como carbohidrato estrutural na parede das células. Tais algas que contêm o agar são denominadas agarófitas e pertencem à classe Rodophyta


O agar é insolúvel em água fria, porém, expande-se consideravelmente e absorve uma quantidade de água de cerca de vinte vezes o seu próprio peso, formando um gel não-absorvível, não-fermentável e com importante característica de ser atóxico. Possui em sua composição principalmente fibras e também sais minerais (P, Fe, K, Cl, I), celulose, anidrogalactose e uma pequena quantidade de proteínas. O agar é muito empregado em microbiologia para culturas sólidas de bactérias. É especialmente útil por manter-se sólido (na verdade com densidade de um gel firme) em temperaturas comummente empregadas para cultura de bactérias (37 graus célsius), temperatura óptima para seu desenvolvimento.

O agar é utilizado em várias áreas: culinária, biologia vegetal, microbiologia e biologia molecular. Sendo importante aqui referir a sua utilização na microbiologia, sendo a área em que o grupo está a trabalhar.

O agar é muito usado em meios de cultura sólidos para bactérias e fungos, mas não para vírus. Alguns vírus podem, no entanto, ser cultivados em bactérias que por sua vez crescem em agar. Menos de 1% de todas as bactérias conhecidas podem ser cultivadas neste tipo de meios, mas a formulação básica do meio de cultura com ágar é adequado para a maioria.

Este tipo de meio de cultura é feito adicionando agar (normalmente 1,5 a 2% (p/v)) e componentes de meio de cultura específicos para cada tipo de microrganismo a água destilada. Esta mistura, após esterilizada, é vertida enquanto líquida para placas de Petri ou tubos. Por vezes é adicionado um suplemento após a esterilização, como por exemplo antibióticos (o calor da esterilização destrói determinados suplementos, não permitindo a sua adição anterior). Após solidificação do meio, este encontra-se apto a permitir o crescimento de microrganismos. Diferentes microrganismos possuem diferentes necessidades nutricionais por isso o meio de cultura é adaptado para satisfazer essas necessidades.

Fontes:

http://www.galeon.com/inmunologia/images/005/nuMcConkeyyEMB.jpg

http://www.trensa.com/cedivet/images/agar_sangre.jpg

Realizado por : Henrique Arruda

Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis é uma espécie microbiológica da família Bacillaceae. Foi descoberto em 1911 na província de Thuringia, Alemanha. Passou a ser utilizado como insecticida na França em 1938, e nos Estados Unidos da América na década de 1950, sendo esta uma bactéria que produz um cristal proteico contendo toxinas de propriedade insecticida.

O seu emprego destina-se principalmente para o controle de lagartas, pragas florestais e vectores representados por pernilongos e borrachudos.

Um dos exemplos do emprego desta bactéria é a utilização da mesma por uma empresa brasileira (Embrapa) no combate à lagarta-do-cartucho tendo sido desenvolvido um insecticida à base dessa bactéria, que mata principalmente as lagartas jovens, com até 4 dias de vida. O processo de produção é dominado, com testes de produção em larga escala e utilização de baixo custo. Sendo o custo de produção muito inferior ao de compostos químicos.

Fontes:

http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/enzimas/auxtransgenic/toxcrystals.jpg

http://www.bvsde.paho.org/bvsaidis/saneab/vii-003.pdf
http://www.catalogosnt.cnptia.embrapa.br/catalogo20/catalogo_de_produtos_e_servicos/arvore/CONT000fk2mg0us02wyiv80u57ezk13poea3.html

http://pt.wikipedia.org/wiki/Bacillus_thuringiensis

Realizado por :Henrique Arruda

Caracterização de UFC ( Unidades formadoras de colónias)

Na última visita de estudo à Universidade dos Açores, as “ bactérias a utilizar estavam numa concentração de 10 elevado a 8 a 10 elevado a 9 UFC(unidades formadoras de colónias)/ml, e foi necessário dilui-las para 10 elevado a -2 com soro fisiológico, obtendo assim uma concentração de 10 elevado a 6 a 10 elevado a 7 UFC/ml.“

A designação de UFC significa que numa mistura heterogénea (suspensão) de células bacterianas, cada mililitro deverá conter milhões de células bacterianas. Mas nem todas estão viáveis. Então diz-se que o número de células bacterianas viáveis presentes numa mistura heterogénea corresponde a UFC ou Unidades formadoras de colónias.

Para proceder à quantificação de UFC existentes numa suspensão/mistura heterogénea bacteriana, é muito útil a técnica de diluição. Esta envolve um conjunto de passos e procedimentos, para além de cálculos complexos na qual não entrarei em pormenor.

http://www.ufv.br/dfp/bac/uni3.pdf

http://bervieira.sites.uol.com.br/dilui.htm

Trabalho realizado por: Sérgio Santos Nº 15

Utilização do DMSO – Dimetilsulfóxido, nos ensaios antibacterianos

Na visita de estudo à Universidade dos Açores, realizada no dia 20 de Janeiro de 2010, foi testada a actividade antibacteriana do extracto clorofórmico da espécie de alga Asparagopsis taxiformis, nas bactérias Escherichia coli, Bacillus thuringiensis e Micrococcus luteus.

Para diluir o extracto clorofórmico da Asparagopsis taxiformis usou-se o solvente Dimetilsulfóxido (DMSO) com formula química (CH3)2SO.
O Dimetilsulfóxido ou também chamado de DMSO, é um solvente polar muito utilizado na indústria e em laboratório. Já na medicina, o DMSO é utilizado como anti-inflamatório.
Esta substância é produzida a partir da oxidação de sulfeto de dimetila. É uma substância de baixa toxidade, que contém um cheiro característico ao alho, que pode ser totalmente absorvido pela pele e entrar na corrente sanguínea. Isto pode causar dois efeitos:

- A área da pele que entrar em contacto com o solvente, fica com o cheiro entranhado.

- Substâncias tóxicas dissolvidas no DMSO, que normalmente só seriam mortais por ingestão ou aspiração, tornam-se mortais por contacto com a pele.

 http://images.google.pt/imgres?imgurl=http://www.securacell.com/images/DMSO.jpg&imgrefurl=http://www.securacell.com/laboratory.asp&usg=__8JJxrqZphkkHpaPWUmN8qQdcMs8=&h=300&w=400&sz=99&hl=pt-PT&start=109&itbs=1&tbnid=w1MKCJPJkaXKNM:&tbnh=93&tbnw=124&prev=/images%3Fq%3DDMSO%26gbv%3D2%26ndsp%3D20%26hl%3Dpt-PT%26sa%3DN%26start%3D100

Trabalho realizado por: Sérgio Santos Nº 15

Polaridades dos Solventes

No nosso projecto utilizamos dois tipos de solventes,metanol e clorofórmio.

O clorofórmio é um líquido incolor e volátil muito utilizado como solvente por ser uma molécula polar forte. Composto por três cloretos, um carbono e um hidrogénio (CHCl3), é um solvente polar, embora seja insolúvel em água, pois não forma pontes de hidrogênio com o par H-OH. Sendo muitas vezes designado como apolar por essa característica.

O metanol é um líquido inflamável, utilizado como solvente e quando puro é utilizado como combustível. É também muito tóxico. Possui na sua composição 4 hidrogénios, um carbono e um oxigénio (CH3OH) é uma molécula polar visto que o oxigénio é mais electronegativo que o carbono.

Moléculas polares: possuem maior concentração de carga negativa numa parte da nuvem e maior concentração positiva em outro extremo.

Moléculas apolares: a carga electrónica está uniformemente distribuída, ou seja, não há concentração.

 Para concluir, é importante conhecer a polaridade dos solventes que estamos a utilizar pois assim podemos perceber melhor o tipo de moléculas retiradas da alga pelos mesmos.Solventes polares retiram moléculas de carga polar e vice-versa.

http://educar.sc.usp.br/quimapoio/solubili.html

http://www.scribd.com/doc/2974483/Quimica-Geral-Exercicios-Resolvidos-Polaridade

http://pt.wikipedia.org/wiki/Polaridade_molecular

http://inorgan221.iq.unesp.br/quimgeral/respostas/metanol_etanol.html

http://br.answers.yahoo.com/question/index?qid=20071110071605AAi2i22

Realizado e postado por André Piques

Visita de Estudo à Universidade dos Açores

Inicio 14:50

Fim 16:45

Visita de estudo á Universidade dos Açores

Participantes: Dra. Carmo Barreto e Dra. Carla Cabral, Prof. Alexandra Seara, alunos André e Sérgio.

Objectivo: Realização dos testes antibacterianos com o extracto clorofórmico de Novembro da Asparagopsis taxiformis, nas bactérias Escherichia coli, Bacillus thuringiensis e Micrococcus luteus.

                A visita de estudo teve inicio ás 14:50 , com a Dra. Carla Cabral, no laboratório de microbiologia, onde começamos a descortinar qual a concentração  de extracto a utilizar nos testes. Como utilizamos o Dimetilsulfóxido(DMSO) - composto muito usado como solvente polar – foi necessária a ajuda da Dra. Carmo para perceber-mos qual a quantidade a utilizar.

                Foram realizados testes em três placas de Petri, cada uma contendo uma espécie diferente de bactérias e em cada placa foi colocado 2 concentrações diferentes de extracto e uma concentração só com o solvente (controlo)

                A placa onde está contida a bactéria E.Coli vai permanecer em estufa a 37ºC pois é mais sensível à temperatura que as outras duas (Bacillus thuringiensis e Micrococcus luteus), que serão mantidas a 30ºC durante algumas horas, em seguida serão mantidas no congelador a -20ºC para não serem alterados os resultados.  

Materiais utilizados:

·         Tubo de ensaio;

·         Gobelé

·         Balança electrónica

·         Micropipetas

·         Vortex

·         Pinças

·         Ependorfs

·         Espalhador

·         Caixas de Petri

·         Álcool etílico

·         Cabine de fluxo laminar

·         Bico Bunsen

·         Estufa

·         Congelador

·         Agár nutritivo

·         Bactérias

·         Suporte de tubos de ensaio

Publicado por : André Piques

        

Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas

A técnica de Gram (coloração de preparações de bactérias para corar as paredes celulares das mesmas) expressa diferentes características, de modo especial no que diz respeito à composição química, estrutura, permeabilidade da parede celular, fisiologia, metabolismo e patogenicidade.

                As paredes celulares das bactérias Gram-positiva e Gram-negativa são diferentes. A parede celular da bactéria Gram-positiva é espessa, 10 a 50nm, chegando até a 80nm e a da Gram-negativa é menos espessa, 7,5 a 10nm. A membrana citoplasmática adere fortemente ao componente interno da célula bacteriana. A parede celular da bactéria Gram-positiva é única e consiste de uma camada espessa, composta quase que completamente por peptidioglicano, responsável pela manutenção da célula e sua rigidez. As múltiplas camadas de peptidioglicano (15 a 50nm) das bactérias Gram-positivas constituem uma estrutura extremamente forte em tensão, enquanto que nas Gram-negativa o peptidioglicano é apenas uma camada espessa e, consequentemente, frágil.

                Como factores de ataque ou agressão, as células Gram-positivas e Gram-negativas caracterizam-se por graus diferentes de virulência. As bactérias Gram-negativas são constituídas por uma endotoxina, o LPS, que lhes confere a propriedade de patogenicidade, enquanto nas bactérias Gram-positivas a exotoxina, composta pelo ácido lipoteicoico, tem como característica principal a aderência.

                É então importante ficar a saber sobre este contexto de modo a avançar nas extracções/experiências, pois sabendo o tipo de parede celular de cada estirpe bacteriana que vamos utilizar, ficamos a saber qual o melhor solvente a utilizar para separar/extrair certas moléculas.

                Exemplos de bactérias gram-positivas:

Staphylococcus aureus    

                Exemplos de bactérias gram-negativas:

Pseudomonas aeruginosa

Haemophilus influenzae

Escherichia coli

Fontes:

http://pt.wikipedia.org/wiki/Gram-positivo#Alguns_microorganismos_gram-positivos

http://www.josevalter.com.br/estudante/biologia.htm

  Realizado e publicado por : Henrique Arruda

Planificação 2º Período

Actividades previstas fora das aulas relativamente à primeira recolha da amostra da espécie de alga Asparogopsis taxiformis: 

• Iniciar a 3º etapa (método de difusão em agar), que consiste na verificação da actividade antibacteriana da espécie de alga em estudo. Para isso, será necessário calendarizar uma ou mais idas à Universidade, uma vez que é lá que se encontra todo o equipamento necessário, para a realização desta etapa do trabalho.

Actividades previstas dentro das aulas relativamente à primeira recolha da amostra da espécie de alga Asparogopsis taxiformis:

  • Com a conclusão da 3º etapa,

o objectivo principal do nosso trabalho, verificar se a nossa espécie de alga contem ou não actividade antibacteriana, não estará concluído sem antes interpretarmos os resultados que obtivemos.

• Acompanhado com isto, Pretendemos também fazer algumas das publicações das postagens para o blog.

Já em relação à segunda recolha da amostra da nossa alga, o procedimento que vai ser usado será o mesmo do período anterior, com fim a averiguar, se a nossa  alga tem ou não efeito antibacteriano.

Publicado por : André, Henrique e Sérgio